威尼德生物科技(北京)有限公司,研发生产的经济型分子杂交仪VH-1000、多功能型分子杂交仪VH-4000、组合型分子杂交仪VH-2000,底部标配培养皿圆周运动托盘,选配250ML/500ML锥形瓶托盘,96孔酶标板托盘,可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的孵育实验,,以及膜洗脱和凝胶脱色,同时可以做恒温微生物培养。分子杂交仪是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免破损带来的污染危害。
让凝胶电泳变得更快,更漂亮
(相关资料图)
方法改进:将电泳电压进行定时变化,例如可以在开始时将电泳电压调节至100V,大约15min,使条带的确可以因为自身片段大小不同而产生较大差别的泳动速度,从而将片段分离,然而现在的分离或许会间距较小,从而图片很不漂亮,或者不易观察.可以紧接着进行120V-130V的电压进行较小差异电泳,但是由于电泳电压较大,可以避免过大的片段残存在胶孔不易泳动的情况.结果:这样两个电压进行配合电泳,便可以得到非常漂亮的电泳条带,并且可以节省1/5-2/5左右的时间.
RNA电泳如何得出漂亮的条带
方法改进:电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——>自来水冲洗干净——>ddH20冲洗——>3%H2O2灌满浸泡过夜——>灭活的0.1%DEPC水冲洗干净——>超净台内紫外线照射过夜. 烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.或者ddH20清洗干净,超净台内紫外线照射过夜. 电泳缓冲液必须是RNase free(最好买试剂公司的,这里推荐生兴的,应为我师兄在生兴做,做点小广告) . 预电泳5-10min减少了非特异RNA条带的出现,有利于分离和纯化,同时可根据电泳仪是否冒泡判断电泳仪装置是否有误. 样品是在电泳缓冲液液略低于胶表面而不是在高过胶面时加进齿槽,避免了加样时RNA的扩散,加样后RNA从齿槽逸出造成RNA的弥散及定位不良等现象. 电泳3-5min让RNA进入凝胶后再加电泳缓冲液液高过表面,确保了加到每个槽中的RNA量及定位的准确性,从而有利于DNA的鉴定和纯化.
威尼德生物科技(北京)有限公司,研发生产的经济型分子杂交仪VH-1000、多功能型分子杂交仪VH-4000、组合型分子杂交仪VH-2000,底部标配培养皿圆周运动托盘,选配250ML/500ML锥形瓶托盘,96孔酶标板托盘,可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的孵育实验,,以及膜洗脱和凝胶脱色,同时可以做恒温微生物培养。分子杂交仪是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免破损带来的污染危害。
如何提高SDS-PAGE的分辨率
方法改进:借鉴Tricine-SDS-PAGE中添加甘油或者尿素来提高分辨率的成功经验,在普通的SDS-PAGE中加入约13%的甘油,同样可以提高分辨率,有效防止小分子量蛋白的弥散.只要把原来配方中的水换成60%的甘油,就可以了.结果:加入甘油之后,条带较细,分得更开.
改进一点点,我们能得到更加美观的SDS-PAGE胶
威尼德生物科技(北京)有限公司,研发生产的经济型分子杂交仪VH-1000、多功能型分子杂交仪VH-4000、组合型分子杂交仪VH-2000,底部标配培养皿圆周运动托盘,选配250ML/500ML锥形瓶托盘,96孔酶标板托盘,可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的孵育实验,,以及膜洗脱和凝胶脱色,同时可以做恒温微生物培养。分子杂交仪是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免破损带来的污染危害。
方法改进:所做的改进很简单却很有效,加完分离胶后,用移液枪吸取酒精(浓度没有特别要求,干净无污染就好)加到分离胶上至覆盖界面,静置片刻后放到37℃恒温箱中可加速胶的凝固.待到分离胶完全凝固之后倒去上层的酒精,就可以看到齐平漂亮的界面啦!改进二:脱色背景:给染色结束的SDS-PAGE胶脱色往往需要比较长的时间,否则会由于脱色不完全而导致条带不清晰,影响到拍照的效果.方法改进:改进的方法很简单易行——取一张我们常常随身携带的面巾纸,打个结放入盛有脱色液的大培养皿里放到脱色摇床上,这样一来,原来过夜脱色达到的效果现在只需要短短的3,4个小时就可以轻松实现了. PS:希望大家这个时候用的面巾纸是质量比较好不容易掉屑的...